ساخت سازهpEGFP-ChEgTrp به عنوان مدل DNA واکسن چند اپیتوپی علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس

Authors

احمدزاده, مژگان

اسمعیلی زاد, مجید

انگجی, سیدعبدالحمید

طهماسب, محمد

محمدی, سمیه

مصری, رقیه

Abstract:

زمینه: آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس سبب بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان میشود. با توجه به شیوع بالای این آلودگی در ایران، مقابله با آن از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی دارد. هدف: مطالعه به منظور تولید و ساخت سازه pEGFP-ChEgTrp به عنوان مدل DNA واکسن چند اپیتوپی علیه انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس انجام شد. مواد و روشها: این مطالعه تجربی در سال 1392در مؤسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی کرج انجام شد. ابتدا اپیتوپهای تحریککننده سیستم ایمنی میزبان با استفاده از پایگاه اطلاعاتی IEDB پیشبینی و توالی کدکننده آن ساخته شد. سپس این توالی با استفاده از واکنش PCR تکثیر شد. محصول PCR پس از هضم آنزیمی با آنزیم محدودکننده Xho I در وکتور pEGFP-N1 کلون شد و باکتری حاوی پلاسمید نوترکیب با روشهای مختلف از قبیل PCR Colony ، الکتروفورز آگارز ژل و توالییابی بررسی گردید. یافتهها: تعداد 4 پپتید حاوی 10 اپیتوپ خطی در آنتیژن EgTrp پیشبینی شد. توالی نوکلئوتیدی کدکننده ChEgTrp با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و با روش PCR تکثیر و قطعهای شامل 270 جفت باز حاصل شد. قطعه مورد نظر وارد وکتور pEGFP-N1 گردید و پلاسمید نوترکیب با روش Colony PCR و الکتروفورز آگارز ژل تأیید شد. برای تأیید نهایی، پلاسمید نوترکیب توالییابی و به این ترتیب سازه ژنتیکی pEGFP-ChEgTrp ساخته شد . نتیجهگیری: قطعه ChEgTrp به طور موفقیتآمیزی در وکتور pEGFP-N1 کلون شد و این پلاسمید میتواند جهت ساخت DNA واکسن استفاده شود.

Upgrade to premium to download articles

Already have an account?login

similar resources

ساخت سازهpegfp-chegtrp به عنوان مدل dna واکسن چند اپیتوپی علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس

full text

طراحی و ساخت آنتی ژن چند اپیتوپی تحریک کننده سلول های t بر علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس و ارزیابی پاسخ ایمنی در موش

در این تحقیق شناسائی اپیتوپ های غالب تحریک کننده سیستم ایمنی اختصاصی سلول های t و بواسطه آن طراحی کاست ژنی وابسته به پنج پروتئین اکینوکوکوس گرانولوزوس شامل eggst, ega31, eg95, egtrp, p14-3-3 و بررسی پاسخ ایمنی آن انجام گرفت. اپیتوپ ها با نرم افزار های propred و iedbبا بهترین قدرت اتصال به مولکول های mhc پیش بینی شدند. پس از سنتز dna، قطعه مورد نظر داخل وکتور بیانی pet41a+ کلون شد به منظور فهم ب...

15 صفحه اول

ایمن سازی بره ها علیه اکینوکوکوس گرانولوزوس با استفاده از پروتواسکولکسها و مایع هیداتید

در مطالعه حاضر، پروتواسکولکسها و مایع هیداتید از کبد و ریه های گوسفندان مبتلا به کیست هیداتید در شرایط استریل جدا گردید. غلظت پروتئینی نمونه‌ها با استفاده از روش برادفورد اندازه گیری شد. 12 بره6-4 ماهه از جنس نر و ماده به طور تصادفی به سه گروه چهارتایی تقسیم شدند. هریک از بره های گروه1و2 (گروههای آزمایش) به ترتیب با یک میلی گرم پروتواسکولکس و مایع هیداتید حل شده در یک میلی لیتر بافرفسفات همراه...

full text

کاربرد dna به عنوان ادجوانت در واکسن

در طبیعت موجودات زنده با پاتوژن ها یا میکروارگانیسم های مختلفی مواجه می شوند و برای ادامه حیات خود به شناسایی و مبارزه با این پاتوژن ها نیاز دارند. پاتوژن ها در ساختار خود ترکیباتی از قبیل لیپوپلی ساکارید، نوکلئیک اسید و لیپوپروتئین دارند که دستگاه ایمنی موجود زنده می تواند آنها را شناسایی کند. از این ساختارهای مولکولی با عنوان الگوهای مولکولی پاتوژن نام می برند. شناسایی الگوهای مولکولی پاتوژن ...

full text

کلون کردن اپیتوپ‌های خطی آنتی ژن P14-3-3 در وکتور pEGFP-N1 به عنوان یک مدل واکسن DNAجهت القا ایمنی علیه کیست هیداتیک و بررسی بیان آن در رده سلولی CHO

زمینه و هدف: کیست هیداتیک در اثر آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد میشود. در مرحله لاروی این انگل آنتیژنهای متعددی تولید میشود که یکی از این آنتیژنها، آنتیژنی از خانواده پروتئینهای p14-3-3 میباشد و واکسن نوترکیب آن ایمنی‌زایی قابل توجهی را در موش القا کرده است. با توجه به ایمونوژنتر بودن نواحی اپیتوپی آنتیژنها و تولید پاسخ ایمنی Th1 مطلوب هدف از این مطالعه کلون کردن ...

full text

طراحی و ساخت واکسن dna چند اپی توپی برای ایجاد ایمنی محافظت کننده علیه ویروس هپاتیت c

زمینه و هدف: تغییرپذیری ویروس هپاتیت c (hcv) مهم ترین مشکل در فرآیند تهیه واکسن علیه این عفونت می باشد. در این مطالعه تجربی، برای ساخت واکسن حفاظت کننده علیه hcv، ساختار dna دربرگیرنده اپی توپ های حفاظت شده از پروتئین های ویروسی طراحی و ساخته شد. به منظور تقویت پاسخ ایمنی القاء شده، از خاصیت ادجوانتی انتهای آمین gp96 (nt(gp96)) استفاده گردید. مواد و روش ها: واکسن چنداپی توپی (pt) hcv کدکننده چه...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

Journal title

مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین

volume 19 issue 4

pages 11- 4

publication date 2015-10

unfollow

{@ msg @}

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com